聚合酶連鎖反應 PCR

Post

 

【主題式複習】 

 

分子生物 01 

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 

〈聚合酶連鎖反應〉 

Polymerase Chain Reaction 

 

111-2 最新申論考點 

 

 


 

 

一、目的 

 

利用 DNA 聚合酶對特定 DNA 序列大量合成

 

進行專一性連鎖複製反應

 

將目標的 DNA 序列片段放大數倍

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 


 

 

二、原料 

 

1. 欲複製雙股 DNA 原始模板 (Template) 

 

2. 引子 (Primers) 

 

3. DNA 合成的原料及緩衝液 (dNTPs) 

 

4. DNA 聚合酶 (Polymerase) 

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 

 

 

 

三、步驟 

 

1.變性 

 

利用高溫 95°C 使雙股 DNA 原始模板變性打開為單股。 

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 

 

 

 

2.黏合 

 

55°C 之環境下,使引子藉由專一性與目標 DNA 片段配對結合。 

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 

 

 

 

3.延長 

 

72°C 之環境下, DNA 聚合酶開始引導 primers , 

 

複製放大目標 DNA 片段。 

 

 

------------------------------------------------------- 

 

 

重複步驟:依序重複執行前三步驟,製作更多的目標 DNA 片段 

 

 

by Ling Li

 

~實習生作品,歡迎批評指教~